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                  pBM28 Toposmart 克隆試劑盒

                  • 更新時間:  2023-09-28
                  • 產品型號:  A-Hc2213
                  • 簡單描述
                  • pBM28 Toposmart 克隆試劑盒保存條件:-20℃保存。
                  詳細介紹

                  商品屬性:

                  產品名稱

                  規格

                  貨號

                  pBM28 Toposmart 克隆試劑盒

                  20

                  A-Hc2213

                  產品介紹:

                  保存條件:-20℃保存。
                  產品介紹:
                  利用痘苗病毒的拓撲異構酶I(Topoisomerase I)的切割再連接的特點將PCR產物定向克隆到線性化的pBM28載體中。適用于克隆由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5 等高保真DNA聚合酶擴增的平末端PCR產物。pBM28 載體類似于公司的pENTR/D-TOPO入門載體, 具有attL1 和attL2,為gateway系統中的入門載體。引物M13F(-21)和M13R可用于菌落PCR和測序鑒定。
                  產品特點:
                  (1)連接反應僅需 5 分鐘。
                  (2)只適合平末端 PCR 產物的快速、高效、定向克隆。
                  (3)載體采用了新的制備工藝,零背景,無需藍白斑篩選。
                  (4)與pBM27載體相比,pBM28載體無標簽序列。
                  (5)載體為壯觀霉su抗性。
                  注意事項:
                  (1)引物要求:PCR 引物5’端不能進行磷酸化修飾,普通商業化引物即可。上游引物的5’ 端添加CACC 四個堿基(CACC 為真核表達所必需的Kozak 序列)。
                  (2)DNA 聚合酶:選用Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和Xerox 等高保真DNA 聚合酶用于PCR 擴增。
                  (3)連接時間:5-15 分鐘,一般為 15 分鐘。
                  (4)連接溫度:室溫 (22℃-37℃),可使用PCR儀控溫。最佳反應溫度為25℃。若片段有高GC等復雜結構,可在37℃反應。
                  (5)產物要求:為保證PCR產物完整,建議72℃后延伸5-10分鐘。連接前使用瓊脂糖凝


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