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                  腸賈第蟲PCR檢測試劑盒說明書

                  • 更新時間:  2019-04-30
                  • 產品型號:  
                  • 簡單描述
                  • 腸賈第蟲PCR檢測試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
                  詳細介紹

                  特點:
                  高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
                  高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100;
                  操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
                  高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

                  產品名稱

                  腸賈第蟲PCR檢測試劑盒說明書

                  英文名稱

                  Giardia intestinalisPCR

                  分類

                  PCR檢測試劑盒

                  樣品 DNA 的制備:
                  1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
                  稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
                  2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
                  3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
                  4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
                  6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
                  7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
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                  使用及效果:
                  PCR反應特點
                  (1) 特異性強
                  PCR反應的特異性決定因素為:
                  ①引物與模板DNA特異正確的結合;
                  ②堿基配對原則;
                  ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
                  ④靶基因的特異性與保守性。
                  其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
                  (2) 靈敏度高
                  PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
                  (3) 簡便、快速
                  PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
                  (4) 對標本的純度要求低
                  不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

                  反應五要素:
                  參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
                  引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
                  ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
                  ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
                  ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
                  ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
                  ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
                  ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
                  ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
                  引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

                  人乙型肝炎病毒X互作蛋白(HBVX-interactingprotein)ELISA試劑盒10mg 1.56-100 ng/mL2',3'-二氫三尖杉寧堿 DIHYDROCEPHALOMANNINE, 2',3'-(P)

                  CEACAM5/CD66e抗體(FITC),兔單抗 53716-50-0 100mg 0.98FCM   奧吩達唑

                  小鼠巨噬細胞,Ana-1細胞 20mg HPLC≥98%Hederacoside D用于含量測定1 x 10^6 cells/T25培養瓶常春藤苷D;常春藤甙D

                  CEBPA抗體,兔多抗,抗原親和純化5mgWB   IP   芍藥內酯苷 ALBIFLORIN(P)

                  偏肺病毒(hMPV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)110642-44-9 20mgEpimedin C HPLC≥98% 0.312-20 ng/mL朝藿定C;羊霍定C,寶藿苷VI

                  ELISAKitforHumanEndothelialcell-specificmolecule162499-27-8 20mg Gastrodin 0.156-10 ng/mL天麻素

                  SIGIRR/TIR8抗體,兔單抗121-33-5C8H8O3Vanillin≥98%FCM   香蘭素

                  人膜鐵轉運輔助蛋白(HEPH)ELISA試劑盒6246-46-410mg 3-Oxours-12-en-28-oic acid 78-5000 pg/mL熊果酸

                  人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)ELISA試劑盒 20mgOroxylin A 7-O-glucuronide HPLC≥98% 1.56-100 ng/mL千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷;木蝴蝶素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷

                  ELISAKitforHumanS-adenosylmethioninesynthaseisoformtype-1100mg 0.312-20 ng/mL5,7-二羥黃 CHRYSIN(RG)

                  MR-VP316-04011 20支Taq Mut S(檢測基因突變的酶)

                  NDRG1/CAP43抗體,兔多抗,抗原親和純化520-33-2C16H14O6Hesperetin≥98%ELISA   WB  IHC-P   IP   橙皮素

                  人臍動脈內皮細胞,HUAECP細胞 20mg HPLC≥98%Neferine用于含量測定1 x 10^6 cells/T25培養瓶基蓮心堿

                  P4HB抗體(FITC),兔單1mgFCM   日本八角茴香果提取物#4 Japanese Star Anise (Illicium anisatum) Fruit Extract #4 BXL(REQUEST QUOTE)

                  對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)23496-41-5 20mgPeimine HPLC≥98% 0.156-10 ng/mL貝母素;貝母素

                  IL-1F5抗體,鼠單抗 67-68-5 5g 0.999ELISA   二亞砜

                  腸賈第蟲PCR檢測試劑盒說明書白屈菜紅堿 CHELERYTHRINE(TODDALINE)(RG)  5mg 人谷氨酰胺酰肽環轉移酶樣(QPCTL)ELISA試劑盒

                  RNA轉染試劑  299-75001 棉子糖-雙岐桿菌鑒定

                  骨化三 20mg Calcitriol ELISAKitforAndrostenedione HPLC≥98%

                  升麻素-4'-O-β-D-葡萄糖苷 5mg  Cimifugin 4'-O-β-D-glucopyranoside 人富組蛋白(HTN-3)ELISA試劑盒

                  3,5-二氯苯胺  500mg  0.999 CD14抗體,鼠單抗

                  腺苷  5g/10g/25g AFP/alpha-fetoprotein抗體(APC),鼠單抗

                  色譜純丙  500ml 大鼠腦星形膠質細胞,CTX細胞

                  2-氨基聯苯[用于糖的測定] 2-Aminobiphenyl [for Sugar determination]>99.0%(GC&T)  100G 人低密度脂蛋白受體(LDLreceptor)ELISA試劑盒

                   


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