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                  關于大鼠ELISA試劑盒操作計算以及注意事項總結
                  瀏覽次數:614發布日期:2020-08-11
                    大鼠ELISA試劑盒操作程序總結:
                   
                    計算
                   
                    以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
                   
                    想要獲得更為準確的實驗數據,我們不僅要嚴格按要求來實驗,還要步驟正確,不然出現一點偏差都會導致數據產生不對,下面給大家講解一下大鼠大鼠ELISA試劑盒操作步驟:
                   
                    1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
                   
                    2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
                   
                    3、樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
                   
                    4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
                   
                    5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
                   
                    6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
                   
                    7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
                   
                    大鼠ELISA試劑盒操作注意事項:
                   
                    1、大鼠ELISA試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
                   
                    2、濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
                   
                    3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
                   
                    4、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
                   
                    5、 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                   
                    6、底物請避光保存。
                   
                    7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
                   
                    8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
                   
                    9、本試劑不同批號組分不得混用。
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