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                  掌握PCR鑒定試劑盒原理,操作流程更順暢
                  瀏覽次數:698發布日期:2020-03-11
                    原理
                   
                    本試劑盒是根據歐盟標準和國家標準而進行設計組裝而成。
                   
                    本方法為熒光PCR檢測方法,反應在同一管內連續進行,操作簡單,并有效防止了污染,能對飼料中的豬源性成分進行快速檢測,具有特異性高、敏感性強和操作簡便的特點,探針報告基團為FAM,淬滅基團為None。
                   
                    特點:
                   
                    1.即開即用,用戶只需要提供病毒RNA模板。
                   
                    2.兩管式RT-PCR,一次RT反應產物可以作為多次PCR的模板。本試劑盒提供10次的RT反應試劑和50次的PCR試劑。
                   
                    3.引物經過優化,特異性高,引物是根據基因的保守區域設計,適用于所有強、中、弱新城疫毒株,產物長度為421 bp。
                   
                    4.PCR mix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
                   
                    操作流程:
                   
                    1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
                   
                    2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
                   
                    3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
                   
                    4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
                   
                    5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
                   
                    6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
                   
                    7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
                   
                    8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
                   
                    9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
                   
                    PCR鑒定試劑盒使用注意事項:
                   
                    1、基礎程序;
                   
                    2、擴增溫度和延伸溫度;
                   
                    3、反應時間;
                   
                    4、循環次數;
                   
                    5、PCR 反應液的配制;
                   
                    6、PCR技術的基本原理;
                   
                    7、PCR的反應動力學;
                   
                    8、PCR擴增產物;
                   
                    9、PCR反應體系與反應條件。
                   
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